Coronavirus berria (SARS-CoV-2) denbora errealeko PCR Kit Multiplexa
Oso sentikorra eta erabiltzeko prest dagoen PCR kit hau liofilizatu formatuan (izoz-lehortzeko prozesua) eskuragarri dago epe luzerako biltegiratzeko.Kita giro-tenperaturan garraiatu eta gorde daiteke eta egonkorra da urtebetez.Aurrenahasketaren hodi bakoitzak PCR anplifikaziorako beharrezkoak diren erreaktibo guztiak ditu, alderantzizko transkriptasa, Taq polimerasa, abiarazleak, zundak eta dNTPs substratuak barne.13ul ur destilatu eta 5ul ateratako RNA txantiloia gehitu behar dira, ondoren PCR tresnetan exekutatu eta anplifikatu daiteke.
qPCR makinak baldintza hauek bete behar ditu:
1. Jarri 8 tira PCR hodiaren bolumena 0,2 ml
2. Lau detekzio-kanal baino gehiago izan:
| Kanala | Zirrara (nm) | Igorpena (nm) | Aurretik Kalibratutako Tindagaiak |
| 1. | 470 | 525 | FAM, SYBR Green I |
| 2 | 523 | 564 | VIC, HEX, TET, JOE |
| 3. | 571 | 621 | ROX, TEXAS-GORRIA |
| 4 | 630 | 670 | CY5 |
PCR plataformak:
7500 denbora errealeko PCR sistema, Biorad CF96, iCycler iQ™ denbora errealeko PCR detektatzeko sistema, Stratagene Mx3000P, Mx3005P
Koronabirus berriaren azido nukleikoaren detektatzeko erreaktibo hotz-katearen garraioaren zailtasuna
Ohiko azido nukleikoak detektatzeko erreaktiboak distantzia luzean garraiatzen direnean, (-20±5) ℃ hotzeko katearen biltegiratzea eta garraioa beharrezkoa da erreaktiboetako entzimaren bioaktiboa aktibo mantentzen dela ziurtatzeko.Tenperatura estandarra iristen dela ziurtatzeko, izotz lehorreko kilogramo behar dira 50 g baino gutxiagoko azido nukleikoen probako erreaktibo kutxa bakoitzeko, baina bizpahiru egun iraun dezake.Industriaren praktikaren ikuspegitik, fabrikatzaileek jaulkitako erreaktiboen benetako pisua ontziaren % 10 (edo balio hori baino askoz txikiagoa) baino txikiagoa da.Pisu gehiena izotz lehorretik, izotz-paketeetatik eta apar-kutxetik dator, beraz, garraio kostua oso altua da.
2020ko martxoan, COVID-19 atzerrian eskala handian pizten hasi zen, eta koronavirus berriaren azido nukleikoaren detektatzeko erreaktiboen eskaera izugarri handitu zen.Hotz-katean erreaktiboak esportatzeko kostu handia izan arren, fabrikatzaile gehienek oraindik ere onartu dezakete kantitate handia eta irabazi handia dela eta.
Hala ere, pandemiaren aurkako produktuen esportazio-politika nazionalak hobetzearekin batera, baita pertsonen fluxuaren eta logistikaren gaineko kontrol nazionalaren hobekuntzarekin ere, erreaktiboen garraio-denboran hedapena eta ziurgabetasuna dago, eta horrek produktuen arazo nabarmenak eragin zituen. garraioaren bidez.Garraio-denbora luzeak (hilabete erdi inguruko garraio-denbora oso ohikoa da) maiz produktuaren hutsegiteak eragiten ditu produktua bezeroarengana iristen denean.Horrek azido nukleikoen erreaktiboen esportazio-enpresa gehienak kezkatu ditu.
PCR erreaktiborako liofilizatutako teknologiak koronavirus berriaren azido nukleikoa detektatzeko erreaktiboa mundu osoan garraiatzen lagundu zuen
PCR liofilizatutako erreaktiboak giro-tenperaturan garraiatu eta gorde daitezke, eta horrek garraio kostua murrizteaz gain, garraio-prozesuak eragindako kalitate-arazoak saihestu ditzake.Hori dela eta, erreaktiboa liofilizatzea da esportazio-garraioaren arazoa konpontzeko modurik onena.
Liofilizazioak disoluzio bat solido egoeran izoztea dakar, eta, ondoren, ur-lurruna sublimatu eta bereizi hutsean.Solutu lehortua konposizio eta jarduera berdina duen ontzian geratzen da.Ohiko erreaktibo likidoekin alderatuta, Liming Bio-k ekoitzitako azido nukleikoak detektatzeko Novel Coronavirus liofilizatu osoko erreaktiboak ezaugarri hauek ditu:
Bero-egonkortasun oso indartsua:56 ℃-tan egon daiteke tratamendua 60 egunez, eta erreaktiboaren morfologia eta errendimendua ez dira aldatu.
Tenperatura normala biltegiratzea eta garraiatzea:ez da hotza katearen beharrik, ez da tenperatura baxuan gorde behar zigilatu aurretik, guztiz askatu hotza biltegiratze espazioa.
Erabiltzeko prest:Osagai guztien liofilizazioa, sistemaren konfiguraziorik beharrik gabe, likatasun handiko osagaiak galtzea saihestuz, hala nola entzimak.
Helburuak multiplexatu hodi batean:detekzio-helburuak koronavirusaren ORF1ab gene berria, N genea, S genea estaltzen ditu birusaren genovariazioa saihesteko.Negatibo faltsuak murrizteko, giza RNase P genea barne-kontrol gisa erabiltzen da, laginaren kalitate-kontrolaren behar klinikoa asetzeko.
